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微儀光學(xué)

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FISH用熒光顯微鏡的應(yīng)用一

返回列表 來(lái)源:本站 發(fā)布日期:2022-03-30 09:59:02【

隨著科學(xué)的發(fā)展的FISH技術(shù)也越來(lái)越成熟,從建立了非放射性原位雜交技術(shù)到如今的多色熒光原位雜交(M-FISH)、 DNA纖維熒光原位雜交技術(shù)(DNA fiber-FISH)熒光免疫核型分析和間期細(xì)胞遺傳學(xué)(FICTION)。FISH技術(shù)和FISH用熒光顯微鏡被越來(lái)越多人了解,認(rèn)識(shí)和用到。


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下面由顯微鏡廠家——天津微儀光學(xué)來(lái)給您介紹下FISH用熒光顯微鏡的應(yīng)用。

 

一、FISH用熒光顯微鏡應(yīng)用于染色體結(jié)構(gòu)變異與非整倍體的檢測(cè)

(1)操作簡(jiǎn)便,立體分辨率高,觀察分析方便,信號(hào)明亮清晰以及安全風(fēng)險(xiǎn)小;

(2)檢測(cè)速度及探針?lè)€(wěn)定性比放射性標(biāo)記探針好,探針標(biāo)記后穩(wěn)定,一次標(biāo)記后可使用二年;

(3)方法敏感,能迅速得到結(jié)果;

(4)在同一標(biāo)本上,利用不同顏色的熒光集團(tuán)標(biāo)記探針可同時(shí)檢測(cè)幾種不同的探針;

(5)不僅可用于分裂期細(xì)胞染色體數(shù)量或結(jié)構(gòu)變化的研究,而且還可用于間期細(xì)胞的染色體數(shù)量及基因改變的研究;

(6)標(biāo)記探針和熒光素試劑均可購(gòu)置,使得FISH程序直接而可靠;

(7)某種特別種類的完整基因組、整個(gè)染色體、染色體亞區(qū)域或單拷貝序列依所用探針的復(fù)雜性可特異地分別開(kāi)來(lái);

(8)重復(fù)序列的雜交可被未標(biāo)記基因組的DNA同探針預(yù)雜交而抑制,這對(duì)定位在大植入探針中的獨(dú)特序列是決定性的。


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二、FISH用熒光顯微鏡應(yīng)用于基因擴(kuò)增和缺失的檢測(cè)

FISH空間分辨率和敏感性使得親本和擴(kuò)增基因在抗病蟲(chóng)害細(xì)胞中定位成為可能。被擴(kuò)增基因主要在同一染色體臂上,但離初始親本基因 有一定距離,且經(jīng)常獨(dú)立地位于染色體端粒部位;FISH分析表明細(xì)胞斷裂可能是由于染色體含有擴(kuò)增區(qū)域的結(jié)構(gòu)重排。同時(shí)用FISH 可定 位轉(zhuǎn)基因植物中外源基因位置和拷貝數(shù),此法在番茄、煙草、大麥、小麥、黑麥等作物中已獲成功。利用FISH技術(shù)也可檢測(cè)一些與遺傳 性疾病相關(guān)的基因缺失,如成功檢測(cè)了aniridia疾病患者的缺失基因。


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三、FISH用熒光顯微鏡應(yīng)用于基因定位

熒光原位雜交技術(shù)可以直接測(cè)定DNA序列在染色體上的定位情況,基因的染色體定位是FISH在分子生物學(xué)上應(yīng)用的重要方面。熒光原位雜交(FISH)技術(shù)還為當(dāng)前著絲粒結(jié)構(gòu)研究提供了重要的研究手段,主要是對(duì)著絲粒重復(fù)序列的分析,包括重復(fù)元件,如α、β和傳統(tǒng)衛(wèi)星DNA的性質(zhì)和分布。FISH可以直接觀察染色體端粒,簡(jiǎn)化了對(duì)其在核內(nèi)的結(jié)構(gòu)和功能研究,定位其端粒序列。

 

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